靶向藥Tositumomab基因檢測用什么樣品最準確
抗體藥物Tositumomab作為一種新型的抗癌藥物,在臨床治療中具有重要意義。由于它是靶向性藥物,臨床病人血液中存在Tositumomab靶向抗體的情況越多,臨床療效越明顯。因此,建立Tositumomab抗體的遺傳檢測方法顯得尤為重要,以有效判斷體內是否有Tositumomab的存在。那么,選擇什么樣品進行Tositumomab基因檢測會更準確?
一、關于Tositumomab靶向抗體的表達
無論是體外實驗還是臨床實驗表明,Tositumomab靶向抗體是通過大量表達在血液中形成的。Tositumomab靶向抗體具有特定的宿主單克隆抗體和自身的結構,會非常穩定的存在于血液中,并保持活力和抗體的完整性,所以從血液中檢測Tositumomab基因是最準確的。
二、Tositumomab基因檢測的步驟
1、采集血樣:由于Tositumomab抗體穩定的存在于血液中,因此可以采集血樣,利用實時熒光定量PCR(qPCR)技術對Tositumomab基因進行檢測。
2、樣品處理:根據 PCR 檢測所需,將采集的血樣進行處理,通常是將靶向抗體進行蛋白質降解,以獲得 DNA 共檢測。
3、設計引物:在設計引物時,應確定設計引物的長度、注釋上下界和堿基雜合度,以保證檢測準確性。
4、進行檢測:在確定參考物種,檢測參數、添加反應體系后,將樣品放入定量PCR機中,進行qPCR的 amplification 和檢測。假如沒有血液樣品,也可以使用其他組織樣品進行Tositumomab抗體的檢測,如:組織病理樣本、結締組織或細胞集落中的克隆細胞樣品,由于表達時間、強度和數量的差異會對檢測結果產生一定的影響。
三、Tositumomab基因檢測的結果評估一般來說,Tositumomab基因檢測的結果會給出 Ct 值(抑制周期)或 Tm(堿基特異性溫度)和 relative copy 數。Ct值越小,表明目標基因的表達數量越多;Tm 值越高,表明反應的特異性越強;而 relative copy 數越高,表明 Tositumomab 的表達數量越多。
綜上所述,由于Tositumomab靶向抗體是通過大量表達在血液中存在,所以從血液中檢測Tositumomab基因更加準確。采集血樣后,通過設計引物,添加反應體系,進行 PCR 檢測,最終獲得Tositumomab基因檢測結果,以便對臨床治療病人進行準確分析。
